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Clickchemistrytools提供點(diǎn)擊化學(xué)反應(yīng)磁珠

更新時(shí)間:2023-11-29   點(diǎn)擊次數(shù):884次

Clickchemistrytools提供點(diǎn)擊化學(xué)反應(yīng)磁珠,包括Azide Magnetic Beads 疊氮標(biāo)記磁珠(貨號(hào):1036),DBCO Magnetic Beads DBCO標(biāo)記磁珠(貨號(hào):1037),Alkyne Magnetic Beads炔基標(biāo)記磁珠(貨號(hào):1035)。


糖基化是一種重要且廣泛存在的翻譯后修飾,糖基化修飾的缺損是許多疾病的一個(gè)標(biāo)志,如腫瘤的發(fā)生發(fā)展、自身免疫性疾病以及某些遺傳性疾病等,已成為目前蛋白質(zhì)組學(xué)研究的活躍領(lǐng)域。由于糖鏈結(jié)構(gòu)的多樣性和微不均一性,目前為止從復(fù)雜的生物樣品體系中富集糖蛋白/糖肽是蛋白質(zhì)糖基化研究的重點(diǎn)和難點(diǎn)。以基于點(diǎn)擊化學(xué)的磁珠富集糖蛋白以及細(xì)胞的代謝標(biāo)記為主要內(nèi)容,探索了糖蛋白富集和分析的新方法一種二硫鍵及末端炔基修飾的磁性納米材料,可通過(guò)化學(xué)點(diǎn)擊反應(yīng)特異性的富集疊氮修飾的糖肽或糖蛋白。以該磁珠為工具,首先優(yōu)化和建立了磁珠富集疊氮糖肽的反應(yīng)條件,證明了磁珠富集疊氮糖肽的有效性。其次,建立了糖鏈的代謝標(biāo)記方法和檢測(cè)方法。疊氮修飾的單糖如四乙酰化疊氮半乳糖胺(Ac4Gal NAz)被細(xì)胞利用進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)的糖代謝,從而使細(xì)胞內(nèi)的糖蛋白標(biāo)記上疊氮基團(tuán),再通過(guò)疊氮和膦或炔基間的點(diǎn)擊化學(xué)反應(yīng)可實(shí)現(xiàn)對(duì)標(biāo)記蛋白的檢測(cè)。最后用磁珠富集已標(biāo)記細(xì)胞的糖肽和糖蛋白。標(biāo)記細(xì)胞的全蛋白酶解成肽段后用磁珠能特異性的捕獲;同時(shí)磁珠也可直接富集疊氮糖蛋白,結(jié)合銀染和凝集素印跡證明了磁珠富集糖蛋白的有效性。最后結(jié)合質(zhì)譜技術(shù),以期能利用磁珠富集方法檢測(cè)和鑒定細(xì)胞內(nèi)的糖蛋白,為O-糖基化富集方法的進(jìn)一步研究提供方案。


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